Микроскопическое исследование на бледную трепонему

Микроскопическое исследование бледной трепонемы темном поле зрения

Микроскопическое исследование на бледную трепонему

Материал для исследования берут с элемента, подозрительного на первичную или вторичную сифилому (эрозия, язва, эрозированная папула), либо путем пункции лимфатического узла.

Элемент очищают стерильным ватным тампоном, после чего прокаленной в пламени горелки и охлажденной петлей слегка поскабливают его поверхность до получения тканевой жидкости.

Последнюю помещают на чистое, обезжиренное предметное стекло с каплей изотонического раствора натрия хлорида и накрывают нетолстым покровным стеклом.

Если получить тканевую жидкость указанным способом нельзя, то рукой в резиновой перчаткё сдавливают сифилому с краев до появления тканевой

жидкости на ее поверхности.

Количество тканевой жидкости и изотонического раствора натрия хлорида должно быть небольшим, так как при большой капле трепонемы будут плавать в жидкости, что затрудняет их обнаружение.

Для исследования в темном поле зрения применяют специальные приспособления к обычному микроскопу.

Пройдя через эти приспособления (конденсоры), лучи света принимают косое направление и концентрируются под острым углом в месте исследуемой капли серрума, не попадая в объектив, чем достигается исследование в темном поле.

Для данной методики можно пользоваться кружком из плотной черной бумаги (конверт от фотобумаги) диаметром 1,5 см, который накладывают на нижнюю линзу развинченного конденсора так, чтобы между краями линз и бумаги оставался свободный ободок (просвет) шириной 1,5-2 мм.

Освещение при исследовании в темном поле зрения должно быть достаточно интенсивным (электрическая лампа 100-150 Вт).

Рассматривают препарат при объективе № 40 и окуляре № 10-15.

При этом на темном фоне можно увидеть большое количество светящихся движущихся точек (белковые и коллоидные частицы), а также клеточные элементы, трудно дифференцируемые, что, впрочем, не входит в задачу исследователя Бледная трепонема имеет вид светлых штопорообразных нитей, движущихся плавно либо маятникообразно. Ее можно спутать с часто встречающейся на половых органах трепонемой сгаssus, однако последняя толще бледной трепонемы, имеет более широкие завитки и движется быстрее.

Данный способ простой и, пожалуй, является наиболее надежным. Бледную трепонему рассматривают в живом состоянии, что позволяет дифференцировать ее и другие виды спирохет.

Микроскопическое исследование на трихомонады.

Трихомоноз характеризуется многоочаговостью поражения. Следовательно, материал для исследования необходимо брать из многих очагов инвазии.

Выделения, соскоб берут у мужчин из мочеиспускательного канала, у
женщин — из боковой и задней частей свода влагалища, мочеиспускательного канала; у девочек — через отверстие девственной плевы желобоватым зондом или браншей вагинального пинцета. Перед взятием материала не рекомендуется туалет наружных половых органов, больного просят длительное время (не менее 3-4 ч) воздержаться от мочеиспускания.

Полученный материал помещают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Если он густой, предварительно добавляют несколько капель теплого изотонического раствора натрия хлорида. Мочеполовые трихомонады необходимо рассматривать под микроскопом в свежем и окрашенном состоянии.

Нативные мазки желательно использовать немедленно. Исследуют при увеличении 10х40 обычным микроскопом или в темном поле зрения фазовоконтрастным.

В свежеприготовленных неокрашенных препаратах мочеполовые трихомонады имеют грушевидную форму, величина их немного больше лейкоцита, движения — толчкообразные поступательные.

При изучении препарата фазовоконтрастным микроскопом можно различить в расширенной части трихомонады жгутики.

Исследование трихомонад только в нативном мазке не исключают смешивания мочеполовых трихомонад с другими видами, встречающимися в организме человека (кишечная, ротовая). Поэтому, наряду с исследованием материала в нативном состоянии, необходимо всегда производить микроскопию окрашенных мазков.

Мазки подсушивают на воздухе и фиксируют. Способ фиксации зависит от метода окраски. Для более детального исследования строения трихомонад (обнаружение ядра, ундилирующей мембраны и других органоидов) мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. В этих случаях препарат фиксируют спиртом и эфиром поровну.

Чаще всего мазки окрашивают 1% раствором метиленового синего или по Граму. Препарат фиксируют обычно над пламенем горелки. Окраска метиленовым синим и по Граму имеет преимущество перед другими методами, заключающееся в том, что в мазках можно одновременно исследовать гонококки и трихомонады.

Трихомонады, окрашенные по Граму, красноватого цвета, а метиленовым синим — синего. Величина их различная. Ядро овальной формы, расположено эксцентрически и окрашивается в более темный цвет по сравнению с протоплазмой. Жгутики не определяются.

Часто в расширенной части трихомонады можно различить маленькую щель — цистому, а в цитоплазме — вакуоли, микроорганизмы, лейкоциты, эритроциты, сперматозооны и др. Для диагностики важным является обнаружение грамотрицательных диплококков (гонококков).

При оценке препаратов, окрашенных метиленовым синим, необходимо дифференцировать трихомонады и эпителиальные клетки, которые больше по размеру, ядро расположено в центре.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Источник: https://studopedia.ru/20_89743_mikroskopicheskoe-issledovanie-blednoy-treponemi-temnom-pole-zreniya.html

Расшифровка анализа на сифилис: слабоположительный, ложный, ложноположительный результат – Про Кровь

Микроскопическое исследование на бледную трепонему

Ложноположительный сифилис – распространенная проблема, столкнуться с которой может любой человек. Тем более что анализы на это заболевания мы сдаем довольно часто.

При определении на стационарное лечение, перед отъездом в санаторий, при приеме на работу. Вполне естественно, что увидев положительные результаты, люди пугаются.

Думают о наличии у себя серьезного, опасного для окружающих заболевания.

В каких случаях возможна диагностика ложноположительного сифилиса, интересуются пациенты у своих докторов, и каким из анализов можно верить.

Кого стоит известить о результатах, и что делать, если они положительны у беременной женщины?

Сифилис: типы анализов на бледную трепонему

Прежде чем разбираться, почему получена ложноположительная реакция на сифилис, необходимо понять, какие анализы сегодня используют для диагностики этого заболевания.

Сифилис – патология, вызываемая бактерией, получившей название бледной трепонемы. Передается она в основном половым путем.

Но при попадании в организм имеет способность поражать не только половые органы, но и тело в целом.

На запущенных стадиях недуга от него страдают нервная, сердечнососудистая, пищеварительная и другие системы, человек нередко не выживает. Раньше диагностика недуга отличалась недостоверностью.

  • Однако сегодня врачи прикладывают усилия для того, чтобы ввести в обиход новые методики, позволяющие поставить диагноз с минимальной вероятностью ошибки.
  • Существует целая группа различных тестов, помогающих им в этом нелегком деле.
  • Нетрепонемные методики

Исследования этой группы направлены не на выявление самого возбудителя, а на поиски его следов. Делается это благодаря определению специальных белков, вырабатываемых либо организмом, либо непосредственно бактерией. Методы этой группы отличаются высокой вероятностью погрешности, однако позволяют понять, насколько сильно выражено заражение.

  • Микрореакция преципитации. Базируется на реакциях, которые происходят между антигенами и антителами. Отличается спорной специфичностью, из-за чего также используется, как скрининговый метод, а не как метод подтверждения. Имеет несколько аналогов.
  • Реакция Вассермана, также известная как RW. Методика широко распространена благодаря тому, что стоит недорого и выполняется быстро. Для ее выполнения подойдут как венозная, так и артериальная кровь, а также спинномозговая жидкость. Относится к группе скрининговых исследований, популярных во всех лабораториях.
  1. Трепонемные тесты
  2. Анализы из этой группы отличаются высокой точностью.
  3. Вероятность получить ложноположительный результат на сифилис при применении этих методик минимальна.

Методы отличаются достаточно высокой стоимостью. С их помощью не рекомендуется вести скрининг, но они отлично подойдут, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз.

  • ИФА методика. Отличается большой популярностью. Основана на определении иммуноглобулинов в кровеносном русле. При этом можно не только определить сам факт заражения, но и сделать примерные выводы о его давности, что бывает важно для выбора медикаментозной терапии и составления прогноза лечения. Также анализ покажет, контактировал ли когда-либо пациент с патогенным микроорганизмом.
  • РИФ реакция. Используется для диагностики болезни на ранних стадиях развития. Отличается низкой вероятностью получения ложноположительных результатов, однако может быть положительной при аллергии и в ряде других случаев.
  • РПГА метод. Основана на определении титра антител к бледной трепонеме. При этом чем выше титр, тем больше времени прошло с момента заражения.

Методы диагностики высокой точности

Методы этой группы отличаются высокой достоверностью, минимальным риском получения неверных результатов. Правда, при этом они известны также своей дороговизной из-за необходимости использовать специфичное оборудование.

  • ПЦР. Метод, основанный на поиске самого микроорганизма, а точнее частиц его ДНК в теле человека. Требует применения специальной аппаратуры, реагентов.
  • Иммуноблоттинг. Комбинированная методика, основанная на сочетании электрофореза и ИФА. Благодаря электрофорезной обработке элементов крови удается значительно увеличить достоверность ИФА-исследования.
  • РИБТ. Анализ, отличающийся высокой специфичностью. Вероятность положительного результата в том случае, если пациент полностью здоров, сведена к минимуму. Используется для диагностики сложных форм сифилиса, протекающих с поражением нервной системы.

Ложноположительный сифилис: почему и когда происходят изменения

Человек может получить ложноположительные результаты стандартных бесплатных исследований при целом ряде состояний, не связанных с заражением бледной трепонемой. Например, это возможно при простуде, при аутоиммунных заболеваниях, травмах различной локализации и др.

Все эти состояния объединены тем, что при них организм начинает усиленно вырабатывать антитела, призванные бороться с антигенами патогенного микроорганизма. При этом некоторые антитела напоминают по структуре те, что вырабатываются при заражении бледной трепонемой.

Отсюда и появляется возможность ложноположительных результатов.

Врачи называют ряд острых состояний, которые способны провоцировать длительное повышение титра антител. К ним относят:

  • ОРВИ и другие подобные недуги, протекающие с повышением температуры тела;
  • инфарктное поражение миокарда;
  • травмы;
  • период после вакцинации;
  • острые отравления.

Отдельно также выделяют ряд состояний, при которых анализ на сифилис может быть положительным хронически. К таким состояниям относят аутоиммунные болезни, патологии печени, возрастные деформации организма, заражение ВИЧ и вирусными гепатитами и др.

Каким анализам на сифилис можно верить

Ложноположительный сифилис встречается довольно редко благодаря высокой специфичности современных исследований. Однако вероятность получения неправильных итогов все равно существует.

Точность анализов во многом зависит от того, как забирался биологический материал, как он хранился непосредственно до начала исследования. Немалой важностью обладают также точность аппаратуры, используемые для различных реакций реагенты.

Важно также, берут для исследования саму бледную трепонему, или ее аналоги. В первом случае удается получить более точные результаты. Так как сведена к минимуму вероятность реакции с похожими антителами.

Однако тесты без использования трепонемы используются наиболее часто. Объясняется это их дешевизной в сравнении с трепонемным вариантом исследований.

Трепонемные варианты анализов могут дать неверные результаты с вероятностью в 1%. Нетрепонемные методики дают погрешность с вероятностью до 10%. Разница ощутима.

Доктора рекомендуют, если нетрепонемный тест показал плюс, пройти более дорогое, но более точное трепонемное обследование. Благодаря этому вероятность ошибки будет сведена к минимуму.

Как понять, ошибочен ли результат анализа на сифилис

Пациенты ошибочно полагают, что если в результатах стоит «положительно» или «отрицательно», то с результатами все понятно. Однако любой доктор скажет, что даже к однозначным результатам стоит относиться с недоверием. Если, например, наблюдается несоответствие клинической картины результатам.

Надпись в графе итогов «сомнительный результат» и вовсе вводит людей, далеких от медицины, в ступор. Первая мысль в этом случае – ошибка исследования.

Сомнительный итог не всегда говорит об ошибке теста.  Порой, как отмечают доктора, он возможен после перенесенного сифилиса. Или в том случае, если болезнь только-только начала развиваться, и еще не успела вызвать полноценную реакцию со стороны иммунной системы организма.

Если нетрепонемное исследование показало сомнительные или резко положительные результаты, пациенту обязательно назначается дополнительный трепонемный тест. По нему уже делаются полноценные выводы о том, произошло ли заражение.

Отрицательный результат свидетельствует о здоровье, а положительный о необходимости прохождения терапии. В любом случае, сомнительные тесты рекомендуется перепроходить повторно. Средний интервал между анализами должен составлять не менее 14 дней.

Ложноположительный сифилис: важность распространения информации

Часто пациенты интересуются вопросом о том, куда обратиться, если сифилидолог определил, что это не сифилис, а реакция положительна.

В первую очередь стоит известить о результатах своего полового партнера. Ему рекомендуется пройти проверку в чисто профилактических целях.

Пациент же направляется от сифилидолога к другим специалистам. Среди них:

  • терапевт в том случае, если есть признаки явного инфекционного процесса типа ОРВИ;
  • инфекционист при подозрении на более серьезные инфекционные болезни, например, на лепру, ВИЧ, гепатиты вирусного типа;
  • иммунолог при подозрении на проблемы с иммунитетом, его снижение из-за причин любого рода;
  • ревматолог в том случае, если есть подозрение на заболевание соединительной ткани и др.

Важно помнить о том, что даже положительный результат с последующим подтверждением диагноза – это не основание для увольнения с работы. Ведь пролеченный сифилис не представляет для окружающих опасности. А если за болезнь вовремя взяться, то наступает полное выздоровление.

Врачи обращают внимание подростков на то, что они также могут пройти обследование и анализы в КВД по месту жительства. При этом информация об их болезни не будет разглашена даже родителям, если диагноз подтвердится.

Возможен ли ложный анализ на сифилис у беременных

Ложноположительный сифилис при беременности – ситуация, с которой может столкнуться любая женщина, вынашивающая малыша в своей утробе. Стоит ли беспокоиться за свое здоровье и здоровье малыша – решать доктору. Любая представительница прекрасного пола в период беременности должна пройти исследование минимум трижды.

Первый раз оно выполняется в 12 недель. Затем повторяется за несколько недель до родов и, наконец, непосредственно перед самими родами. Естественно, получая положительные результаты реакции Вассермана, используемой в этом случае, женщина беспокоится о том, откуда у нее заболевание.

Если после наступления беременности или вообще в последние полгода не было перемены половых партнеров и есть полная уверенность в его здоровье, значит опасения напрасны. Анализ с высокой долей вероятности ложный.

Дало в том, что беременность – процесс, сопровождающийся не только мощными изменениями в гормональной сфере, но и выраженной перестройкой иммунитета.

Иммунная система должна подготовиться к нахождению в теле, по сути, чужеродного организма в течение продолжительного количества времени. Естественно, в это время вырабатывается множество антител, некоторые из которых по структуре похожи на антитела к сифилису. Они и дают положительную реакцию при проверке.

Подготовка к исследованию на сифилис во избежание неверных результатов

Какой комплекс анализов сдать, если подозревают ложноположительный сифилис, интересуются пациенты у своих докторов. Как уже говорилось, рекомендуется прохождение трепонемных тестов. Они позволяют с точностью до 99,9% поставить верный диагноз.

Перед тестами рекомендуется небольшая подготовка. Во-первых, стоит отказаться от употребления алкоголя, жирной и жареной пищи минимум за 24 часа до тестирования. Во-вторых, явиться в поликлинику или КВД для сдачи крови стоит в утреннее время, на голодный желудок. Перед исследованием рекомендуется небольшой отдых для того, чтобы организм не испытывал стресса.

Диагностика сифилиса до сих пор представляет некоторые трудности из-за вероятности получения ложных результатов обследования. Естественно, пациентам необходимо знать, в каких случаях анализы могут давать неверные результаты, и как перепровериться.

Ведь игнорирование болезни, как и лечение отсутствующей патологии могут привести к серьезным осложнениям!

Источник: https://igl-clinic.ru/venerologiya/rasshifrovka-analiza-na-sifilis-slabopolozhitelnyj-lozhnyj-lozhnopolozhitelnyj-rezultat.html

Микроскопическое исследование на бледную трепонему

Микроскопическое исследование на бледную трепонему

У больных с подозрением на сифилис исследованию на бледную трепонему подлежат все высыпания, особен но эрозивные и язвенные на коже и слизистых оболочках полости рта, половых органов и заднего прохода. Если ис следование высыпных элементов невозможно или за труднено, то прибегают к пункции лимфатических узлов.

Бледная трепонема располагается в тканевых щелях, между волокнами соединительной ткани, вокруг лимфатических и кровеносных сосудов, в стенках и даже про светах лимфатических капилляров. Материалом, который необходим для бактериологического исследования на бледную трепонему, является тканевая жидкость (се рум).

Для получения тканевой жидкости из высыпных элементов сифилиса существует несколько методов.

Перед взятием материала для исследования поверхность эрозивных или язвенных элементов предварительно осторожно очищают ватным или марлевым тампоном, смоченным в изотоническом растворе хлорида натрия, после чего осушают, не допуская травмирования во избе жание кровотечения.

Через некоторое время на поверхности исследуемого элемента начинает выделяться довольно обильная ткане вая жидкость. Если этого не происходит, то можно осто рожно поглаживать поверхность эрозии или язвы бактериологической петлей или металлической лопаткой.

Тканевую жидкость для исследования можно получить также путем сдавливания (массажа) пальцами в резино вой перчатке подозрительной эрозии или язвы, а также путем создания относительного вакуума с помощью би ровской баночки.

При отсутствии эрозирования или изъ язвления высыпаний материал для исследования можно получить путем скарификации их поверхности скальпе лем. Если проводилось местное лечение или трепонема не найдена, то следует назначить больному на несколько дней влажновысыхающие повязки из изотонического раствора хлорида натрия и затем производить повторное исследование.

Пункцию лимфатического узла осуществляют у больного в положении лежа с соблюдением всех правил асеп тики. Для пункции используют острую иглу с тупо сре занным концом и шприц с хорошо притертым поршнем. Игла и шприц должны быть сухими.

Исследуемый лим фатический узел фиксируют I и II пальцами левой руки, а правой со шприцем и надетой на него иглой делают по слойный прокол кожи и лимфатического узла. Прокол делают по длинной оси узла, продвигают иглу до конца узла, слегка массируя его. Затем медленно выдвигают иглу назад, одновременно отсасывая шприцем содержи мое лимфатического узла.

При так называемой «пункции с обогащением» рекомендуется ввести в корковый слой лимфатического узла 0,1–0,2 мл стерильного изотониче ского раствора хлорида натрия, движением поршня шприца промассировать узел и затем отсосать содержи мое. Пунктат лимфатического узла используют для ис следования на бледную трепонему по обычной методике, причем перед исследованием его желательно не смеши вать на предметном стекле с изотоническим раствором хлорида натрия.

Наилучшим методом обнаружения бледных трепонем для диагностики сифилиса является микроскопическое исследование нативных (естественных, влажных) препа ратов в темном поле. Исследование в темном поле основа но на феномене Тиндаля: если в темное помещение про пустить через узкую щель солнечный свет, то начинают ярко светиться мелкие пылинки, невидимые при обыч ном освещении.

Это происходит оттого, что находящиеся в воздухе пылинки отражают солнечные лучи в разных направлениях и часть этих лучей попадает в наш глаз. При микроскопическом исследовании в темном поле ис пользуется специальный конденсор, направляющий лучи света от осветителя под очень малым углом к плоскости столика микроскопа, вследствие чего свет не попадает в окуляр микроскопа, и поле зрения является темным. Ис следуемый объект отражает свет и становится четко ви димым на темном фоне. Исследование в темном поле микроскопа позволяет изучать бледную трепонему в жи вом виде, а также дифференцировать ее от других трепо нем как по морфологическим признакам, так и по харак терным особенностям движения. Для получения затемненного поля зрения при отсутствии специального конденсора можно пользоваться спосо бом М. П. Архангельского. Для этого между двумя линза ми конденсора Аббе на нижнюю линзу накладывают кружок из плотной черной бумаги с таким расчетом, что бы по краю линзы оставался просвет в 2–3 мм. Для того, чтобы кружок не смещался, по его краю оставляют при вырезании четыре выступа такой длины, чтобы они упи рались в металлическую оправу линзы. Приготовление препарата для исследования в затемненном поле зрения производится следующим образом. Каплю серозного экссудата, полученного с поверхности исследуемого элемента, помещают в центре тонкого пред метного стекла, предварительно обезжиренного смесью равных частей спирта и эфира. Для исследования в темном поле предметные стекла должны быть не толще 1,1–1,2 мм, без царапин, совершенно чистыми. Капля с исследуемым материалом не должна выходить за преде лы покровного стекла. Рядом с каплей серозного экссуда та наносят равную по величине каплю изотонического раствора хлорида натрия; быстро смешав обе капли, по крывают их покровным стеклом. В некоторых лабораториях, однако, с успехом микроскопируют только серозный экссудат без добавления изо тонического раствора. На верхнюю линзу темнопольного конденсора наносят каплю иммерсионного масла или дистиллированной воды, к которой прижимают приго товленный препарат. Микроскопию проводят с объекти вом 40 и окуляром 10 или 5. Источник света устанавливают так, чтобы световой луч падал на зеркало микроскопа. После того как препарат помещен на столик микроско па и установлен источник света, тубус микроскопа с объ ективом под контролем глаза осторожно опускают почти до покровного стекла. Затем поворотами зеркала добива ются наиболее яркого освещения поля зрения и после этого, не отрывая глаза от окуляра, очень осторожно под нимают тубус микроскопа до тех пор, пока не появится темное поле со светящимися в нем твердыми частицами, находящимися в броуновском движении. Среди них мо гут обнаруживаться отдельные нейтрофилы, лимфоциты, эпителиальные клетки. Если препарат сильно загрязнен этими элементами, то лучше приготовить новый препа рат. Бледная трепонема в темном поле зрения представ ляется в виде нежной спирали или тонкого нежного пунк тира. Она слабо преломляет свет и имеет серебристый оттенок. Важное значение имеет оценка характерных для бледной трепонемы движений. При микроскопии не сле дует смешивать с трепонемой нити фибрина — длинные (с большими завитками) образования, производящие впечатление подвижных за счет тока жидкости. Большей частью они очень тонки и неравномерны по толщине. Бледную трепонему следует дифференцировать от других трепонем, прежде всего встречающихся на поло вых органах и в полости рта. На половых органах необхо димо иметь в виду T. refringens. Она значительно толще бледной трепонемы, сильнее преломляет свет, имеет не многочисленные неравномерные, грубые, широкие, более покатые и менее глубокие завитки. Концы ее заострены, движения резкие, беспорядочные. Также следует отли чать от бледной трепонемы T. balanitidis, похожую на T. refringens, отличающуюся значительной длиной, тол щиной и имеющую 6–10 завитков. При исследовании материала, взятого из полости рта, необходимо учитывать наличие здесь следующих трепонем: 1) T. microdentium (T. denticola) — она короче и, как правило, толще бледной трепонемы, завитки ее не сколько заострены, угловаты, она сильнее прелом ляет свет, выглядит ярче, перемещается медленнее, сгибательные движения редки; 2) T. buccalis обладает 3–10 широкими, плоскими, не равномерными завитками, сильно преломляет свет, оживленно движется, концы ее тупые; 3) T. vincenti (из фузоспириллезного симбиоза) пред ставляет собой тонкую и нежную трепонему с пло скими и неравномерными завитками, иногда имею щую 2–3 пологих завитка; движения ее активны, но беспорядочны, она светится ярче бледной трепоне мы. Бледные трепонемы плохо окрашиваются анилино выми красителями, но восстанавливают нитрат серебра в металлическое серебро, которое откладывается на поверхности трепонем и делает их видимыми при микро скопии. На этом феномене основано обнаружение блед ных трепонем в тканях. Метод Levaditi и Manouelian. Кусочки кожи или других органов, толщиной 1–2 мм фиксируют в 10% форма лине в течение 24–48 ч, промываются 96% этанолом в те чение 12–16 ч, затем промывают дистиллированной водой до погружения кусочков на дно сосуда. После этого проводится импрегнация 1% раствором нитрата серебра с 10% раствором пиридина. Кусочки выдерживают в этой смеси (в темной банке с притертой пробкой) 2–3 ч при комнатной температуре, а затем 4–6 ч при температуре 50 °С в термостате. Затем препараты быстро промывают в 10% растворе пиридина, после чего в течение нескольких часов проводится восстановление серебра 4% пиррогало вой кислотой с добавлением 10% очищенного ацетона и 15% раствора пиридина. Метод Морозова — один из наиболее быстрых мето дов серебрения бледных трепонем, дающих вполне удов летворительные результаты [Овчинников Н.М. и др., 1987]. Для окраски по методу Морозова необходимы следующие реактивы: — реактив № 1 — 1 мл ледяной уксусной кислоты, 2 мл 40% раствора формалина и 100 мл дистиллированной воды; — реактив № 2 — 5 г танина, 100 мл жидкой карболовой кислоты и 100 мл дистиллированной воды; — реактив № 3 — раствор нитрата серебра (в 100 мл дис тиллированной воды растворяют 5 г кристаллического нитрата серебра; из этого количества в отдельный сосуд отливают 20 мл; к остальным 80 мл раствора нитрата се ребра по каплям прибавляют крепкий водный раствор аммиака, пока образующийся желто коричневый, а за тем буро черный осадок не растворится и не останется лишь легкая опалесценция; если добавление аммиака вовремя не прекращено, то из оставшихся 20 мл раство ра нитрата серебра приливают по каплям этот раствор до появления легкой опалесценции), для окраски реак тив разбавляют дистиллированной водой 1:10. Импрегнация. Тонкий препарат высушивают на воздухе, но лучше в термостате. На 1 мин наливают на препарат реактив № 1, затем жидкость сливают, препарат обмывают водой. Протравливают реактивом № 2 при подогревании до появле ния паров (1 мин). Тщательно промывают водой, наливают реактив № 3, слегка подогревают в течение 1–2 мин, пока ре актив не станет темно коричневым. Препарат вновь тщатель но промывают водой и высушивают. Микроскопируют с им мерсионной системой. При этом методе импрегнации трепонемы коричневые или почти черные, у них сохраняются морфологические особенности. Препараты не подлежат длительному хранению.

Окраска по Романовскому — Гимзе. Фиксацию мазка осуществляют в смеси Никифорова (этанол и эфир в рав ных объемах). После испарения с мазка фиксирующей жидкости производят окраску препарата краской Рома новского — Гимзы, разведенной из расчета 2 капли краски на 1 мл дистиллированной воды.

Для этого 10–15 мл раз веденной краски наливают в чашку Петри, на две стек лянные палочки мазком вниз опускают предметное стек ло и оставляют препарат для окрашивания на 2–5 ч, в зависимости от интенсивности окрашивающей способ ности раствора.

После окончания окрашивания предмет ное стекло с мазком осторожно промывают боковой струей воды. Высушивают препарат при комнатной температу ре. Микроскопическое исследование проводят в иммер сионной системе.

При окраске препаратов по методу Ро мановского — Гимзы бледная трепонема приобретает розовый или розовато фиолетовый цвет, в то время как другие трепонемы окрашиваются в интенсивно синева тые тона.

Источник: А. Н. Родионов. Сифилис. 2000

Источник: https://med-books.info/venericheskie-bolezni-kojnyie/mikroskopicheskoe-issledovanie-blednuyu.html

Books-med
Добавить комментарий